肖江蓉¹ , 刘建强² , 黄顺¹ , 方银娣³ , 彭洪翠¹ , 李慎瑰¹ , 张小菊¹

1 武昌首义学院城市建设学院, 武汉, 430070; 2 襄阳市产品质量监督检验所, 襄阳, 441000; 3 京山县公共检验检测中心, 荆门, 448000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 22 篇   
收稿日期: 2018年07月09日    接受日期: 2018年09月03日    发表日期: 2020年07月15日

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WRKY 是一类专一结合 W-box 序列的转录因子，它对植物抗病、损伤、衰老等生物学过程起到调控作用，尤其是在植物次级代谢物质合成中起到了重要调控作用。本研究采用中国红豆杉细胞转录组数据库序列设计引物，从中国红豆杉基因组中克隆转录因子基因 TcWRKY26，该基因大小为 2 202 bp；构建pBI121 超表达载体，转化农杆菌 LBA4404，并通过农杆菌介导转化红豆杉细胞，继而基于 RT-qPCR 技术对表达体系进行基因表达量的检测分析，发现转录因子基因明显超表达，相对表达量提高了 2.92~3.49 倍，紫杉烷合成相关酶 dbat 基因也有明显的超表达，相对表达量提高了 1.78~2.03 倍，说明 TcWRKY26 基因对dbat 基因有明显的上调作用，继而为构建高产、稳定的红豆杉基因改良细胞株提供参考依据。

红豆杉细胞；紫杉醇；转录因子；TcWRKY26；RT-qPCR