研究报告

铁皮石斛及霍山石斛ISSR鉴定体系的建立与优化  

段媛媛 , 卢超 , 郭杰 , 郭晓亮 , 周武先 , 游景茂
湖北省农业科学院中药材研究所,恩施, 445000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2018年06月22日    接受日期: 2018年07月23日    发表日期: 2019年08月05日
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摘要
采用均匀设计和单因素试验相结合的方法,探寻鉴定铁皮石斛及霍山石斛 ISSR-PCR 最佳的各组分(即引物, 2伊Taq Master Mix,模板 DNA)用量, 为进一步利用 ISSR分子标记鉴别铁皮石斛和霍山石斛提供理论依据。结果表明, ISSR-PCR最佳反应体系为: 20 滋L的反应体系中含有 2伊Taq Master Mix 11.5 滋L,模板 DNA 35 ng, 引物 0.4 滋mol/L。此外,筛选出 6 条多态性较好、条带稳定的引物(UBC826, UBC827, UBC834,UBC842, UBC849及 UBC817),并对该反应体系进行了验证,结果表明,所选引物及最佳反应体系对铁皮石斛和霍山石斛的ISSR扩增稳定性强,可用于铁皮石斛和霍山石斛的鉴定。
关键词
铁皮石斛;霍山石斛;ISSR;体系优化

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《分子植物育种》印刷版
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