李萌 , 王虹 , 赵海莹 , 黄韵萍 , 杨锦芬^*

国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室, 岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学), 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心, 广州, 510006
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2018年05月14日    接受日期: 2018年06月10日    发表日期: 2019年05月15日

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转录因子可有效调控植物次生代谢产物的生物合成，本研究从姜科药用植物阳春砂(Amomum villosum Lour.)中克隆获得两个 WRKY 转录因子基因，命名为 AvWRKY 40-1 和 A vWRKY 40-2。两个基因的编码框分别为 852 bp 和 885 bp，分别编码 283 和 294 个氨基酸。AvWRKY 40-1 和 AvWRKY 40-2 编码的蛋白序列一致性为 75%，在 GenBank 中均比对上拟南芥的 WRKY 40，且均含有 WRKY 转录因子家族所共有的 WRKKYGQK 七肽序列及 CX5CX23HNH 锌指结构域。系统发育进化树表明：AvWRKY 40-1 和 AvWRKY 40-2 与菠萝(Ananas comosus)的 AcWRKY 71 亲缘关系最近，且与单子叶植物的 WRKY 聚为一支。两个基因在阳春砂果皮和种子团中的表达有差异，并且与阳春砂转录组中筛选出来的萜类合酶基因表达相关性也存在差异，AvWRKY 40-1 表现出与萜类合酶基因更高的相关性。成功构建了两个基因的重组表达载体 pDEST 17-AvWRKY 40-1 和 pDEST 17-AvWRKY 40-2，经诱导表达得到其融合蛋白。本研究首次克隆阳春砂的 WRKY类转录因子基因并获得其融合蛋白，为后续 AvWRKY 40-1 和 AvWRKY 40-2 的功能鉴定及其对萜类的代谢调控研究提供基础。
 

阳春砂；WRKY 转录因子；基因克隆；序列分析；原核表达