哈尔滨师范大学生命科学与技术学院, 哈尔滨, 150025
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 29 篇
收稿日期: 2018年04月09日 接受日期: 2018年05月16日 发表日期: 2019年02月20日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 29 篇
收稿日期: 2018年04月09日 接受日期: 2018年05月16日 发表日期: 2019年02月20日
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摘要
本研究以寒地稗草为实验材料,采用正交试验方法对影响 ISSR-PCR 反应体系的 4 个因素进行优化。研究结果表明,寒地稗草 ISSR-PCR 的最佳反应体系(20 滋L)为:10伊PCR Buffer (含 Mg2+) 2 滋L,dNTPs 浓度为 0.3 mmol/L,引物浓度为 0.2 滋mol/L,Taq DNA 聚合酶为 0.75 U ,模板 DNA 含量为 20 ng。并确定了引物 UBC888 的最佳退火温度为 51.9℃。利用该反应体系对 15 份寒地稗草的基因组进行扩增,结果证明优化后的 ISSR 反应体系稳定可靠,可为稗草种质资源的遗传多样性研究提供理论基础。
关键词
寒地稗草;ISSR;正交试验;反应体系
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