李心悦^1,2 , 张克闯^2,3 , 张道远^2* , 李进¹ , 王玉成⁴

1 新疆师范大学, 干旱区植物逆境生物学重点实验室, 乌鲁木齐, 830054; 2 中国科学院新疆生态与地理研究所, 中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室, 乌鲁木齐, 830011; 3 中国科学院大学, 北京100049; 4 东北林业大学, 林木遗传育种国家重点实验室, 哈尔滨, 150040
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 14 篇   
收稿日期: 2018年03月15日    接受日期: 2018年04月06日    发表日期: 2019年01月17日

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为了在家苹果祖先——新疆野苹果(Malus sieversii (Ledeb.) Roem.)中快速获得目标基因的表达，旨在建立一种高效的外源基因瞬时表达系统。本研究以木本植物新疆野苹果组培苗为转化材料，采用农杆菌侵染法，将携带 pCAMBIA1301 空载体的 EHA105 农杆菌菌株转化至野苹果植株，并进行了瞬时表达条件的研究，确立了转化菌液 OD600 为 0.6，侵染时间为 3.5 h 的最优转化条件。在此最优条件下，将分别含有 EsDREB2B 和 ScALDH21 外源基因的农杆菌菌株 EHA105 转化野苹果组培苗，经基因组 DNA PCR 电泳检测以及半定量 RT-PCR 电泳检测均证明已成功转化，且初步验证了这两种外源基因的耐盐功能。为后续抗逆相关基因的原位功能验证提供了基础，同时也为未来新疆野苹果抗逆基因的快速筛选鉴定提供了一定的技
术支撑。
 

瞬时转化；农杆菌侵染法；GUS 基因；EsDREB2B 基因；ScALDH21 基因