丁苗苗¹ , 刘阳¹ , 李晓旭¹ , 王猛¹ , 田姣¹ , 王玲霞¹ , 徐婷婷¹ , 纳小凡¹ , 梁文裕^1,2

1 宁夏大学生命科学学院, 银川, 750021; 2 宁夏大学, 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室, 银川, 750021
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 22 篇   
收稿日期: 2018年01月31日    接受日期: 2018年03月05日    发表日期: 2019年08月15日

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proA 编码的 酌- 谷氨酰磷酸还原酶(GPR)是脯氨酸合成途径的关键酶。该研究通过设计特异性引物克隆获得全长 1 308 bp 的发菜 proA 基因(GenBank 登录号为 KX553954)。与点形念珠藻的 proA 基因及其推译的氨基酸序列相似性分别为 91%和 93%；氨基酸序列中第 123 位的 Leu 疏水性最强，第 80 位的 Lys 亲水性最强；Thr、Ser 和 Tyr 分别有 19、12、4 个磷酸化位点；proA 编码的蛋白为膜外蛋白，其二级结构由 琢 螺旋、茁 折叠、无规卷曲和 茁 转角构成。将 proA 基因在大肠杆菌表达，获得一个 47.22 kD 的外源蛋白，MALDI-TOF-TOF/MS 分析证明该外源蛋白为 酌- 谷氨酰磷酸还原酶。随着干旱胁迫程度的增加，发菜 proA 在转录水平的差异表达及脯氨酸含量均呈现增加的趋势。研究结果对深入研究发菜 proA 的分子功能及阐明其在干旱胁迫下的调控机制具有重要意义。

干旱胁迫；发菜；酌- 谷氨酰磷酸还原酶；基因克隆；差异表达