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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 21 篇
收稿日期: 2017年10月03日 接受日期: 2017年11月03日 发表日期: 2018年08月17日
Chen M.M., Zhang R.J., Zha Q., Yang L.Y., Li X., Yin L.Q., and Zhang Y.C., 2018, Induction and development of lily
somatic embryo and internal reference genes screening for RT-PCR in different tissues, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding),16(15): 4982-4990 (陈敏敏, 张茹佳, 查倩, 杨柳燕, 李心, 殷丽青, 张永春, 2018, 百合体胚诱导、发育及不同组织实时定量 PCR 内参基因筛选, 分子植物育种, 16(15): 4982-4990)
本研究筛选观赏百合(Lilium oriental伊Trumpet hybrid)体胚诱导、发育不同时期及不同组织中稳定表达的内参基因,以观赏百合品种‘ConcaD'Or’为研究对象,采用实时荧光 PCR 分析百合 8 个候选内参基因(18S, α-TUB, GAPDH, UBQ, bHLH, ACT, EIF, EF1)在体胚诱导不同时期、体胚发育不同阶段及不同组织中的扩增效果,并采用 Genorm、NormFinder 和 BestKeeper 三种软件对候选内参基因在百合中的表达稳定性进行综合评价。结果表明:bHLH 在体胚诱导、发育及不同组织中的稳定性优于其他基因;GAPDH 及 ACT 在观赏百合‘ConcaD'Or’上扩增效果差。将体胚诱导不同时期、体胚发育不同时期及不同组织的扩增数据放在一起分析,GeNorm 和 NormFinder 软件评估最适内参基因为 bHLH 和 EIF,BestKeeper 软件评估最适内参为 EF1
和 bHLH。本研究建立了观赏百合实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选体系并选出观赏百合体胚诱导、发育
及不同组织表达最稳定的前三个内参基因分别为 bHLH、EIF 和 EF1。关键词 百合, 内参基因, 实时荧光定量 PCR, 体细胞胚胎 bHLH,EIF和 EF1。