研究报告/Research Report

百合体胚诱导、发育及不同组织实时定量 PCR 内参基因筛选  

陈敏敏2 , 张茹佳 1 , 查倩1 , 杨柳燕1 , 李心1 , 殷丽青1 , 张永春1* , 张永春1
1 上海市农业科学院林木果树研究所, 上海, 201403; 2 南京农业大学园艺学院, 南京, 210095
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2017年10月03日    接受日期: 2017年11月03日    发表日期: 2018年08月17日
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推荐引用:

Chen M.M., Zhang R.J., Zha Q., Yang L.Y., Li X., Yin L.Q., and Zhang Y.C., 2018, Induction and development of lily
somatic embryo and internal reference genes screening for RT-PCR in different tissues, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding),16(15): 4982-4990 (
陈敏敏, 张茹佳, 查倩, 杨柳燕, 李心, 殷丽青, 张永春, 2018, 百合体胚诱导、发育及不同组织实时定量 PCR 内参基因筛选, 分子植物育种, 16(15): 4982-4990)

摘要

本研究筛选观赏百合(Lilium orientalTrumpet hybrid)体胚诱导、发育不同时期及不同组织中稳定表达的内参基因,以观赏百合品种‘ConcaD'Or’为研究对象,采用实时荧光 PCR 分析百合 8 个候选内参基因(18S, α-TUB, GAPDH, UBQ, bHLH, ACT, EIF, EF1)在体胚诱导不同时期、体胚发育不同阶段及不同组织中的扩增效果,并采用 GenormNormFinder BestKeeper 三种软件对候选内参基因在百合中的表达稳定性进行综合评价。结果表明:bHLH 在体胚诱导、发育及不同组织中的稳定性优于其他基因;GAPDH ACT 在观赏百合‘ConcaD'Or’上扩增效果差。将体胚诱导不同时期、体胚发育不同时期及不同组织的扩增数据放在一起分析,GeNorm NormFinder 软件评估最适内参基因为 bHLH EIFBestKeeper 软件评估最适内参为 EF1
bHLH。本研究建立了观赏百合实时荧光定量 PCR 内参基因的筛选体系并选出观赏百合体胚诱导、发育
及不同组织表达最稳定的前三个内参基因分别为
bHLHEIF EF1关键词 百合, 内参基因, 实时荧光定量 PCR, 体细胞胚胎
bHLHEIF EF1

关键词
百合; 内参基因; 实时荧光定量 PCR; 体细胞胚胎

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《分子植物育种》印刷版
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