研究报告/Research Report

一种快速提取猕猴桃RNA的新方法  

邓浪1,2 , 包昌艳1,2 , 周军1,2 , 王连春1,2 , 刘惠民1,2 , 纪晴1,2 , 沈兵琪1,2 , 周凡1,2 , 王大玮1,2
1西南地区生物多样性保育国家林业局重点实验室, 昆明, 650224;
2西南林业大学, 西南山地森林资源保育与利用省部共建教育部重点实验室, 昆明, 650224
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2017年09月29日    接受日期: 2017年10月25日    发表日期: 2018年05月22日
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摘要

本研究通过参考CTAB法、异硫氰酸胍法、Trizol法、SDS法以及“快速从含有高含量淀粉的种子胚乳中分离高质量RNA”方法,以‘Hort-16A’的幼叶、花和幼果进行总RNA提取,并对上述方法的结果进行比较。在综合上述方法进行改进后,筛选出了快速、稳定、操作简单、成本低,适合猕猴桃总RNA提取方法。与所参考的几种方法比较,该新方法提取RNA完整清晰。将提取RNA反转录cDNA为模板,以AP2基因和AG基因设计两对特异引物进行RT-PCR扩增,获得条带明亮单一,完整,经测序为所需目的条带。该新方法提取的RNA可为下一步进行基因克隆和功能验证实验提供数据资料。

关键词
Hort-16A; 猕猴桃; RNA;RT-PCR

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《分子植物育种》印刷版
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