张盾^1,2 , 任梦云² , 张银东^2* , 关潇^1*

1 中国环境科学研究院, 北京, 100012; 2 海南大学热带农林学院, 海口, 570228
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 17 篇   
收稿日期: 2017年10月17日    接受日期: 2017年11月20日    发表日期: 2018年05月23日

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利用桃儿七叶绿体全基因组开发 cpSSR 引物，使用正交设计试验，对桃儿七 cpSSR-PCR 反应体系中的 5 种主要因素(模板 DNA, Mg²⁺, Taq DNA 酶, dNTPs 及 ISSR 引物)进行筛选优化来研究桃儿七遗传多样性。选取甘肃碌曲县则岔石林桃儿七居群样本及 13 个不同桃儿七居群验证该反应体系。正交试验表明：各因素显著性为 Mg²⁺>引物>Taw 酶>DNA 浓度>dNTPs，桃儿七 cuss-PCR 反应的最佳体系为(25 μL)：DNA20 ng/μL，Mg²⁺ 1.5 mmol/L，dNTPs 2.0 mmol/L，Taq DNA 酶 0.5 U，引物 1.0 μmol/L，2.5 μL 10xBuffer。该体系具有很高的稳定性和重复性，并为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。 

桃儿七；cpSSR-PCR；引物开发；正交试验