研究报告/Research Report

金银花糖基转移酶基因LjUGT71E1的克隆及原核表达  

徐道华1 , 亓希武1,2 , 陈吟1 , 于盱1 , 房海灵1 , 梁呈元1*
1江苏省中国科学院植物研究所, 南京, 210014; 2江苏省农业种质资源保护与利用平台, 南京, 210014
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 6 篇   
收稿日期: 2017年08月18日    接受日期: 2018年01月31日    发表日期: 2018年06月21日
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摘要

糖基化广泛存在于生物体中,具有非常重要的作用,而糖基转移酶则是催化糖基化反应的关键酶。本研究根据转录组数据库,设计引物从金银花(Lonicera japonica Thunb.)中克隆得到一个糖基转移酶编码基因LjUGT71E1,序列分析表明该基因的CDS为1 503 bp,理论可编码氨基酸数目为501,等电点(pI)预测为5.09,理论分子量为55 579.71 Da。多重序列比对表明LjUGT71E1与其它植物UGT71家族成员在序列上保守性很高,并且其C端具有催化植物次生代谢产物糖基化的糖基转移酶所具有的保守的PSPG-box基序。系统发生分析表明LjUGT71E1与人参(Panax ginseng)和甜叶菊(Stevia rebaudiana)的UGT71E亚家族成员聚为一支。荧光定量PCR分析表明,该基因在金银花的五个花期均有表达,在幼蕾时期相对表达量达到峰值。进一步构建了LjUGT71E1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,为后续的功能研究提供了基础。

关键词
金银花;LjUGT71E1;基因克隆;表达分析;原核表达

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《分子植物育种》印刷版
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