郝庆林¹ , 郑珊¹ , 李刚^2* , 李正文 ^1* , 唐美琼 ² , 周琼 ¹ , 胡姗姗¹ , 宁弋珍¹ , 裴艳艳¹

1 广西大学农学院, 南宁, 530004; 2 广西药用植物园, 广西药用资源保护与遗传改良重点实验室, 南宁, 530023
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 8 篇   
收稿日期: 2017年07月24日    接受日期: 2017年08月25日    发表日期: 2018年04月21日

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基于转录组 Unigene 序列信息，结合 RACE 技术，克隆罗汉果生长素响应因子基因 SgARF8 的全长。采用同源克隆法获取罗汉果 SgACTIN 基因，以该基因为内参，通过实时荧光定量 PCR 检测 SgARF8 在罗汉果不同器官组织中的时空表达。结果表明：获得 SgARF8 基因 cDNA 全长序列 3 266 bp，GenBank 登录
号 KU949383，最长 ORF 为 2 547 bp，编码 848 aa 的蛋白质，预期分子量 94.42 kD，等电点 5.67，该编码蛋白具有 DBD、CTD 和 MR 等转录因子 ARF 特征性结构域，其 5' 端和 3' 端区域比较保守；克隆得到罗汉果内参基因 Actin 基因部分序列，命名为 SgACTIN，GenBank 登录号为 KU949382；实时荧光定量分析表明，罗汉果SgARF8 在茎、叶、芽、雌蕊、雄蕊、幼果中普遍表达，并且在雌蕊和 15 d 幼果中表达量较高。可见 SgARF8 广泛参与罗汉果生长发育调节过程，尤其与雌蕊和幼果的器官形态建成密切相关，也暗示该基因在罗汉果性别调控和单性结实遗传改良中具有重要应用价值。

罗汉果；生长素响应因子；SgARF8；克隆；基因表达