研究报告/Research Report

利用Crispr/cas技术定向编辑水稻过氧化氢酶基因OsCAT2  

刘家林1,2,3 , 欧阳林娟1,2,3 , 曾嘉丽1,2,3 , 傅军如1,2,3 , 贺浩华1,2,3 , 朱昌兰1,2,3 , 彭小松1,2,3 , 贺晓鹏1,2,3 , 陈小荣1,2,3 , 边建民1,2,3 , 徐杰1,2,3 , 孙晓棠1,2,3 , 周大虎1,2,3 , 胡丽芳1,2,3*
1 江西农业大学作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室, 南昌, 330045; 2 江西省超级稻工程技术研究中心, 南昌, 330045; 3 双季稻现代化生产协同中心, 南昌, 330045
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 14 篇   
收稿日期: 2017年09月21日    接受日期: 2017年10月22日    发表日期: 2018年08月16日
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推荐引用:

Liu J.L., Ouyang L.J., Zeng J.L., Fu J.R., He H.H., Zhu C.L., Peng X.S., He X.P., Chen X.R., Bian J.M., Xu J., Sun X.T.,
Zhou D.H., and Hu L.F., 2018, CRISPR
/Cas9-mediated editing of the rice catalase gene OsCAT2, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 16(15): 4929-4933 (刘家林, 欧阳林娟, 曾嘉丽, 傅军如, 贺浩华, 朱昌兰, 彭小松, 贺晓鹏, 陈小荣, 边建民, 徐杰, 孙晓棠, 周大虎, 胡丽芳, 2018, 利用 CRISPR/Cas9 技术定向编辑水稻过氧化氢酶基因 OsCAT2, 分子植物育种, 16(15): 4929-4933)

摘要

过氧化氢酶(catalase, CAT)作为重要的抗氧化酶,可催化细胞内过氧化氢的分解,为了研究水稻过氧化氢酶基因 OsCAT2 的功能,首先根据在线软件 http://crispr.mit.edu/ 搜寻向导 sgRNA 序列,选择 OsCAT2基因第三外显子上的“GTGGAGAACCGAACAATAACTGG”作为目标靶序列,然后构建了 OsCAT2 CRISPR/Cas9 载体 BGK03-OsCAT2,将目的载体转化水稻粳稻 9522 后共获得了 7 个独立的转基因株系,其中包括在 PAM 附近发生编辑的独立转基因株系 2 个,编辑方式主要表现为缺失和错配。与野生型相比,转基因植株较矮、分蘖数增加、叶片呈明显的病叶状、成熟时期育性明显降低,这为深入研究水稻 OsCAT2 基因的作用机制提供了帮助。

关键词
水稻; 过氧化氢酶; CRISPR/Cas9; 转基因

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《分子植物育种》印刷版
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