研究报告/Research Report

酵母双杂诱饵表达载体pGBKT7-ufgt的构建与表达  

董燕梅 , 张鹏飞 , 张小军 , 高燕 , 温鹏飞*
山西农业大学园艺学院, 太谷, 030801
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2017年06月19日    接受日期: 2017年06月23日    发表日期: 2018年03月10日
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摘要

构建葡萄赤霞珠(Vitis vinifera L. cv Cabernet Sauvignon)花色苷合成前体酶——类黄酮葡萄糖基转移酶(UDPG-flavonoid-3-O-glycosyltranferase, Ufgt)诱饵表达载体。通过RT-PCR扩增获得葡萄ufgt基因CDS序列,与pGBKT7酵母诱饵载体连接;经测序和双酶切鉴定后,转化酵母菌株AH109,分析Ufgt蛋白在酵母菌株中的表达情况。成功扩增出ufgt基因CDS全长,并成功构建了pGBKT7-ufgt,重组载体pGBKT7-ufgt成功的转化到AH109酵母菌株中,且无毒和自激活性,能够正确稳定的表达。pGBKT7-ufgt酵母诱饵蛋白表达载体被成功构建,为后续Ufgt蛋白互作筛选奠定基础。

关键词
ufgt;诱饵蛋白;酵母双杂交

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《分子植物育种》印刷版
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