丁一^1,2 , 耿晓丽² , 何守朴² , 潘兆娥² , 贾银华² , 王立如² , 吴立强^1* , 杜雄明^2*

1 河北农业大学农学院, 保定, 071000; 2 中国农业科学院棉花研究所, 棉花生物学国家重点实验室, 安阳, 455000
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《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2019年10月24日    接受日期: 2019年10月31日    发表日期: 2021年01月28日

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本研究以棕色棉品种‘棕 1-61’为受体材料，以 β- 葡萄糖苷酸酶基因(GUS)为报告基因，探索农杆菌介导离体培养胚珠的遗传转化条件。结果表明最适合的遗传转化条件是：1 DPA 胚珠预培养 4 d 后，用针头进行扎孔处理形成伤口，在 OD₆₀₀ 为 0.6~0.8 的农杆菌菌液中侵染 3 min，22 ℃黑暗条件下共培养 20 h 后转移至含 500 mg/L 卡那霉素的 BT 培养基上进行暗培养。GUS 染色结果发现，暗培养 20 d 的胚珠和 30 d 的纤维上均有染色，证明 GUS 报告基因转化成功。进一步将目的基因 GhUFGT 构建 RNAi 载体并进行转基因，荧光定量 PCR 检测发现转基因阳性胚珠中 GhUFGT 基因的表达量与对照相比显著下降。该实验为研究纤维发育和色泽相关基因的功能提供了一种快速高效的遗传转化方法。

棕色棉；胚珠；农杆菌介导法；遗传转化；离体培养