研究报告
肉桂几丁质酶基因CcCHI 的克隆及其原核表达 
闵远洋 
,
李韵雪 ,
吕佳 ,
麦晋贤 ,
廖沛然 
,
杨全
,
李韵雪 ,
吕佳 ,
麦晋贤 ,
廖沛然 ,
杨全
广东药科大学中药学院, 国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室, 国家中药材产业技术体系广州综合试验站, 广东省南药规范化种
植与综合开发工程技术研究中心, 广州, 510006
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 17 篇
收稿日期: 2021年09月01日 接受日期: 2021年09月16日 发表日期: 2023年01月30日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 17 篇
收稿日期: 2021年09月01日 接受日期: 2021年09月16日 发表日期: 2023年01月30日
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摘要
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几丁质酶(Chitinase, CHi)是一类广泛分布在高等植物中的水解酶，作用于真菌的细胞壁，是植物抵御真菌病害的重要功能蛋白。本研究从肉桂转录组中挖掘出一个几丁质酶基因 CcCHI，并对该基因进行了克隆与原核表达研究。结果表明，CcCHI 基因长 1 206 bp，经生物信息学分析，该基因序列编码 402 个氨基酸，蛋白理论相对分子量为 43.22 kD，等电点为 9.13。经序列比对与系统进化树分析，CcCHI 与沉水樟中的吁类几丁质酶亲缘关系最近。通过构建 pET-32a(+)-CcCHI 原核表达质粒并转化大肠杆菌中进行诱导表达后，经真菌抑菌试验发现该蛋白具有一定的抗真菌活性。本研究首次发掘了肉桂中的几丁质酶基因，并初步研究了其蛋白的抗真菌活性，为进一步研究肉桂抗真菌病害的分子机制与抗病品种选育提供理论基础。 |
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几丁质酶(Chitinase, CHi)是一类广泛分布在高等植物中的水解酶，作用于真菌的细胞壁，是植物抵御真菌病害的重要功能蛋白。本研究从肉桂转录组中挖掘出一个几丁质酶基因 CcCHI，并对该基因进行了克隆与原核表达研究。结果表明，CcCHI 基因长 1 206 bp，经生物信息学分析，该基因序列编码 402 个氨基酸，蛋白理论相对分子量为 43.22 kD，等电点为 9.13。经序列比对与系统进化树分析，CcCHI 与沉水樟中的吁类几丁质酶亲缘关系最近。通过构建 pET-32a(+)-CcCHI 原核表达质粒并转化大肠杆菌中进行诱导表达后，经真菌抑菌试验发现该蛋白具有一定的抗真菌活性。本研究首次发掘了肉桂中的几丁质酶基因，并初步研究了其蛋白的抗真菌活性，为进一步研究肉桂抗真菌病害的分子机制与抗病品种选育提供理论基础。 |
关键词
肉桂(Cinnamomum cassia)；原核表达；基因克隆；几丁质酶
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